我國建立首株HCC-7721/VCR細(xì)胞系

——比現(xiàn)有同類細(xì)胞系耐藥性有大幅提高

2006年01月19日 近日，空軍總醫(yī)院肝膽外科張希東主治醫(yī)師等在《第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》發(fā)表研究論文，報告他們采用長春新堿（VCR）大劑量間歇誘導(dǎo)法，首次在國內(nèi)成功建立一株具有耐藥細(xì)胞的基本生物學(xué)特性的耐長春新堿人肝癌細(xì)胞系HCC-7721/VCR。經(jīng)檢索，目前國內(nèi)尚無同類成果報道。這一研究成果，為學(xué)術(shù)界從分子水平研究肝癌細(xì)胞多藥耐藥（MDR）機(jī)制，建立了堅(jiān)實(shí)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

據(jù)介紹，臨床許多腫瘤患者在經(jīng)歷化療之后，腫瘤細(xì)胞對藥物產(chǎn)生多藥耐藥。目前認(rèn)為，這種多藥耐藥性的產(chǎn)生，主要與以下機(jī)制有關(guān)：（1）發(fā)生在細(xì)胞膜水平的藥物攝取減少和外排增多，引起細(xì)胞內(nèi)藥物的絕對濃度降低；（2）發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞器水平的藥物亞細(xì)胞分布改變，使藥物無法作用靶點(diǎn)；（3）藥物靶點(diǎn)的質(zhì)和量改變；（4）細(xì)胞解毒系統(tǒng)功能增強(qiáng)。但以上機(jī)制多見于血液系統(tǒng)腫瘤，對實(shí)體瘤的多藥耐藥則難以完全解釋。肝癌是化療敏感性最差的惡性實(shí)體瘤，它具有抗腫瘤藥物天然耐藥和化療中繼發(fā)性耐藥特性。因此，建立穩(wěn)定的肝癌細(xì)胞系，是研究肝癌特殊耐藥機(jī)制的前提和基礎(chǔ)。

近年來，研究人員采用長春新堿(抗腫瘤藥物)大劑量間歇誘導(dǎo)法，通過體外對肝癌HCC-7721細(xì)胞株的培養(yǎng)建模、倍增時間測定及藥物敏感試驗(yàn)等程序和手段，成功建立起一株耐長春新堿人肝癌細(xì)胞系HCC-7721/VCR。該細(xì)胞系經(jīng)鑒定，HCC-7721/VCR細(xì)胞系較HCC-7721細(xì)胞株的長春新堿半數(shù)致死亡濃度(IC50)增大了4.15倍；對多種化療藥物如5-氟尿嘧啶(5-FU)、絲裂霉素(MMC)、順鉑(CDDP)、阿霉素（ADB）均產(chǎn)生耐藥，其耐藥性提高了2~4倍。在生長曲線檢測中發(fā)現(xiàn)，HCC-7721/VCR細(xì)胞系的倍增時間為373小時，其耐藥倍增時間延長是HCC-7721細(xì)胞株的3.9倍。同時還發(fā)現(xiàn)，其細(xì)胞系增殖速度減慢與HCC-7721細(xì)胞株相比，有顯著性差異（P<0.01）。提示HCC-7721/VCR系是一個明確的多藥耐藥細(xì)胞模型，具有耐藥細(xì)胞系的基本生物學(xué)特性。

據(jù)張希東介紹，研究腫瘤多藥耐藥機(jī)制是腫瘤治療領(lǐng)域的一個熱點(diǎn)課題，其前提——建立穩(wěn)定的耐藥細(xì)胞系已引起人們的極大關(guān)注。目前，體外誘導(dǎo)腫瘤耐藥細(xì)胞系的方法有兩種：一是大劑量藥物間歇誘導(dǎo)法；二是藥物濃度遞增法。研究表明，大劑量藥物間歇誘導(dǎo)法的給藥方式與臨床化療相似，誘導(dǎo)的耐藥細(xì)胞長期培養(yǎng)于無藥培養(yǎng)液中，仍保持穩(wěn)定的耐藥性及細(xì)胞生物學(xué)特性，這有利于耐藥細(xì)胞系在研究應(yīng)用中的穩(wěn)定性和可靠性。該研究建立的耐長春新堿人肝癌細(xì)胞系HCC-7721/VCR均具有上述特性，對于研究揭示肝癌細(xì)胞耐藥機(jī)制具有重要意義和應(yīng)用前景。