腦力智寶對乳鼠腦神經(jīng)細胞有營養(yǎng)作用
《中國臨床康復》2004年第8卷第34期報道了首都醫(yī)科大學北京神經(jīng)科學研究所包金風、廣州中醫(yī)藥大學中醫(yī)基礎教研室張曉文等對中藥腦力智寶對乳鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)細胞和PC12細胞生長發(fā)育的影響的研究報告。
腦力智寶是由益智仁、龜甲、枸杞子、石菖蒲、核桃仁、當歸、遠志、紅花等組成的中藥復方,臨床和實驗研究證實其具有增強神經(jīng)生長因子(NGF)受體表達、促進兒童智力發(fā)育、改善大腦微循環(huán)和腦能量代謝、提高腦內(nèi)RNA含量,促進腦內(nèi)蛋白質(zhì)的合成及促進多巴胺能神經(jīng)功能等作用。
方法:將SD大鼠分為腦力智寶提取物高劑量組(0.63g/L)、低劑量組(0.04g/L)和對照組,連續(xù)給藥7次后眼球取血制備含藥血清,用MTT法檢測腦力智寶對原代培養(yǎng)神經(jīng)細胞生長發(fā)育的影響;用分散培養(yǎng)法培養(yǎng)PC12細胞,測定加入不同濃度腦力智寶提取物(0.63和0.04g/L)、腦力智寶含藥血清(6和3g/kg)、神經(jīng)生長因子后PC12細胞在24、48和72小時的突起陽性細胞百分比。
結果證實: 腦力智寶對PC12細胞具有營養(yǎng)作用,使細胞突起增加增長,陽性細胞數(shù)增多,48小時時0.63g/L腦力智寶提取物可使陽性細胞百分數(shù)從模型組的17.2%提高到38.4%(t=4.89,P<0.01),3g/kg腦力智寶含藥血清可使陽性細胞百分數(shù)達到69.0%(t=9.37,P<0.01),并可促進原代培養(yǎng)鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)細胞的生長發(fā)育,MTT法檢測A值明顯增加,尤以0.63g/L腦力智寶提取物組和3g/kg腦力智寶組作用明顯。0.63g/L腦力智寶提取物可顯著促進PC12細胞增殖,細胞數(shù)目較對照組分別增加,差異均有顯著性意義(t=2.67,5.27,3.12;P<0.05~0.01),均與對照組比較有顯著性差異;6g/kg含藥血清組亦顯著增加。腦力智寶提取物和含藥血清均可促進無血清培養(yǎng)神經(jīng)細胞軸突生長,對原代培養(yǎng)的神經(jīng)細胞均具有促進生長作用,使突起陽性細胞數(shù)增加。
研究人員指出,在神經(jīng)元發(fā)育和再生過程中,神經(jīng)軸突的延長和引導是其主要特征,神經(jīng)元的突起是研究腦發(fā)育和退化的重要指標,NGF對神經(jīng)元的營養(yǎng)支持起重要作用,若缺乏NGF的營養(yǎng)支持,將引起神經(jīng)元的早衰和老年性癡呆的發(fā)生。PC12細胞是研究神經(jīng)元軸突生長發(fā)育的理想細胞模型,其具有NGF的核受體,NGF可誘導PC12細胞的分化從不斷增殖生長狀態(tài)細胞轉變成具有軸突等交感神經(jīng)元特征的終末分化細胞。目前研究細胞營養(yǎng)作用有關的體外實驗皆采用無血清培養(yǎng)細胞的方法,以消除血清中一些其他營養(yǎng)因素的影響,但由于原代培養(yǎng)的神經(jīng)元體外不易存活,故本實驗采用血清培養(yǎng)然后轉為無血清培養(yǎng)的方法。
本研究表明,腦力智寶在一定范圍內(nèi)能促進PC12細胞的增殖,呈較好的量效關系,形態(tài)學觀察腦力智寶對PC12細胞具有營養(yǎng)作用,使細胞突起增加增長,陽性細胞數(shù)增多,48小時時0.63g/L腦力智寶提取物可使陽性細胞百分數(shù)從模型組的17.2%提高到38.4%,3g/kg,腦力智寶含藥血清可使陽性細胞百分數(shù)達到69.0%,并能夠促進原代培養(yǎng)的鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)細胞的生長發(fā)育的作用,MTT法檢測A值明顯增加,尤以0.63g/L腦力智寶提取物和3g/kg腦力智寶含藥血清組作用明顯。表明腦力智寶確含有對神經(jīng)細胞營養(yǎng)作用的有效成分。推測可能腦力智寶除具有NGF受體激動作用外,其所含有的一些成分本身就具有促進神經(jīng)細胞生長發(fā)育的作用。另外,該藥中益智仁含有的益智醇具有鈣調(diào)節(jié)作用,而鈣在NGF合成過程中起著第二信使的作用。有文獻報道當歸對坐骨神經(jīng)損傷后的再生具有促進作用,推測可能腦力智寶除具有NGF受體激動作用外,其所含成分可能具有促進神經(jīng)細胞生長發(fā)育的作用,其作用機制尚待進一步探討。